中性粒細胞來源于骨髓,與細胞的吞噬和消化功能有關。中性粒細胞分離是實驗室常規(guī)性實驗,以下是具體操作內容。
試劑與耗材:人淋巴細胞分離液、RP1640、15ml離心管4支,蜀科低速離心機,棉球,止血帶、碘伏、采血針,5mlEDTA抗凝采血管2支。1ml 槍及槍頭。
分離步驟:
1. 所有試劑恢復室溫;
2. EDTA抗凝采血管收集人外周血10ml;
3. 分別將5ml外周血加入5ml人淋巴細胞分離液中(15ml離心管中進行);注意動作輕柔緩緩加入;
4. 蜀科低速離心機500g離心,30-35分鐘,室溫;
5. 離心后收集低帶中性粒細胞,分兩層,層為單核細胞,第二層為中性粒細胞;(若離心后分層不明顯則多離心5-10分鐘)
6. 將RP1640用純水稀釋為50%RP1640用于重懸中性粒細胞,恢復細胞活性。(5-10分鐘)
7. 400g離心10分鐘,去上清,收集中性粒細胞,重懸于RP1640中,細胞計數(shù)。
在細胞分離實驗中,蜀科低速離心機肩負重任。蜀科低速離心機運行中可改變參數(shù),操作簡單、運行平衡、性能穩(wěn)定、安全可靠,“TD-5Z臺式低速多管架離心機”更曾入選“國產(chǎn)好儀器”。蜀科低速離心機廣泛應用于,放射免疫、生物化學、食品衛(wèi)生、環(huán)保等科研領域,選擇選購!
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